应用特异性探针药物分析双峰驼CYP2D6酶体外活性

摘要：

动物CYP酶是代谢药物、外源性化学物质和内源性化合物的超家族酶系,其中CYP2D6亚酶虽然只占动物肝CYP酶系的2％,却承担着约20％左右的药物代谢.作者旨在较为系统地研究双峰驼CYP2D6酶的体外活性及其对特异性抑制剂的敏感性.采用差速离心法制备双峰驼肝微粒体,借助BCA法和CO还原差示光谱法测定肝微粒体蛋白浓度和CYP总酶含量.并在优化肝微粒体孵育体系及建立CYP2D6酶的特异性底物氢溴酸右美沙芬及其活性代谢产物去甲右美沙芬高效液相色谱法的基础上,研究双峰驼CYP2D6酶的动力学特征、底物代谢率及特异性抑制剂奎尼丁对该酶的抑制作用.结果表明,双峰驼肝微粒体蛋白浓度、CYP总酶含量均能满足试验要求.建立的测定酶底物和产物的HPLC法灵敏度高、稳定性好,且各成分分离完全、峰形良好、无干扰.双峰驼CYP2D6酶的Vmax值为(0.141 6±o.052 7)nmol·(min·mg)-1,Km值为(12.986 0±o.357 2)μmol·L-1.奎尼丁对双峰驼CYP2D6酶的半数抑制浓度IC50为(2.779 0±0.063 9)μmol·L-1.因此,该试验不仅为深入研究双峰驼CYP2D6酶体外活性成功建立并优化了反应体系,而且得出了双峰驼CYP2D6酶动力学参数和特异性抑制剂的IC5o值,填补了该领域的空白.

关键词：双峰驼、肝微粒体、CYP2D6酶、酶动力学、特异性探针药物、抑制剂

所属期刊栏目：47

分类号：S859.7(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31260623

在线出版日期：2017-02-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2501-2509