水貂阿留申病毒纳米PCR检测方法的建立与初步应用

摘要：

为建立便捷、灵敏的水貂阿留申病病毒(AMDV)纳米PCR检测方法,根据AMDV NS1基因的保守序列设计一对特异性引物,对纳米PCR反应的退火温度、胶体金浓度进行了优化;测序检测扩增基因是否发生变异;对特异性和灵敏度进行了评估.结果表明,此纳米PCR的最佳退火温度为51℃,普通PCR为55℃;加入胶体金最佳浓度在0.2～0.8 nmol·L-1,纳米PCR与普通PCR产物测序相似性大于99％.特异性检测表明该纳米PCR方法只扩增AMDV而不能扩增犬瘟热病毒和水貂肠炎细小病毒.在粪尿样品检测中该纳米PCR敏感性比普通PCR高10倍.检测40份临床样品,结果表明该方法比对流免疫电泳检测敏感性提高,从而为用粪、尿等低病毒样品检测水貂阿留申病提供了一种新的有效方法.

关键词：水貂阿留申病病毒、纳米PCR、检测

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分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：科技部科技基础性工作专项2012FY111000;山东省自主创新及成果转化专项2014ZZCX07105

在线出版日期：2016-12-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2288-2293