转PRL基因小鼠遗传性状分析

摘要：

本研究以原核注射法生产的乳腺特异性表达PRL基因小鼠为模型,从外源基因遗传完整性、拷贝数和插入位点3方面对其进行遗传性状分析,为今后大型转基因动物的选育提供基础.采用基因组DNA PCR方法筛选发生外源基因片段部分缺失的小鼠,并进行Southern blot验证,以检测外源基因的遗传完整性;用绝对荧光定量PCR方法测定外源基因拷贝数,用Genome walking方法分析外源基因整合位点.结果显示,外源基因片段部分缺失率为1.91％;整合十几个拷贝外源基因的小鼠在便携UV灯下可见绿色荧光,整合2个拷贝的小鼠无绿色荧光;在NW 001073945.1序列的2 025～2 026 bp和NW 001030574.1序列的10 760 020～10 760 021 bp处插入的外源基因可正常表达.以上结果说明,外源PRL基因在原核注射法生产的转基因小鼠中可稳定遗传;在一定范围内,外源基因的表达量与拷贝数呈正相关;附近无其他基因的外源基因插入位点有利于外源基因的表达.

关键词：转基因动物、遗传性状、原核注射、外源基因插入位点、拷贝数

所属期刊栏目：47

分类号：S865.13(狩猎、野生动物驯养)

资助基金：国家转基因重大专项2014ZX08007-001;国家自然科学基金31560632;广西自然科学基金项目2014GXNSFAA118084

在线出版日期：2016-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1861-1867