10.11843/j.issn.0366-6964.2016.06.025
兔胎儿成纤维细胞的分离培养和鉴定
本研究旨在建立稳定传代的兔胎儿成纤维细胞系及其鉴定方法.取配种后14~15 d的兔胎儿,0.25%胰酶消化胎儿皮肤获得兔胎儿成纤维细胞,体外传代培养;通过观察细胞形态、测定生长曲线、免疫荧光染色、核型分析等鉴定兔胎儿成纤维细胞,PCR扩增SRY基因鉴定2株细胞系性别.研究结果表明,兔胎儿成纤维细胞呈梭形,可在体外快速生长,符合“潜伏期—对数期—平台期”的生长规律;免疫荧光染色结果显示,波形蛋白与纤维连接蛋白染色为阳性,细胞角蛋白染色为阴性,表明兔胎儿成纤维细胞纯度高,活性好;染色体检测结果显示,在传至第5代时,80%的成纤维细胞核型正常,为2n=44,属正常范畴;PCR法检测的2株细胞系均来源于兔雄性胎儿.综上表明,本研究建立了兔胎儿成纤维细胞系体外培养、传代、鉴定及其性别鉴定方法,可为转基因兔、克隆兔、兔诱导性多能性干细胞等研究提供充足、可靠的成纤维细胞来源.
兔胎儿成纤维细胞、细胞分离、培养、鉴定
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S814.8;S829.1(普通畜牧学)
家畜胚胎工程与繁殖创新团队ASTIP-IAS06-2016;国家自然科学基金面上项目31472100
2016-09-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
1272-1279