兔胎儿成纤维细胞的分离培养和鉴定

摘要：

本研究旨在建立稳定传代的兔胎儿成纤维细胞系及其鉴定方法.取配种后14～15 d的兔胎儿,0.25％胰酶消化胎儿皮肤获得兔胎儿成纤维细胞,体外传代培养;通过观察细胞形态、测定生长曲线、免疫荧光染色、核型分析等鉴定兔胎儿成纤维细胞,PCR扩增SRY基因鉴定2株细胞系性别.研究结果表明,兔胎儿成纤维细胞呈梭形,可在体外快速生长,符合“潜伏期—对数期—平台期”的生长规律;免疫荧光染色结果显示,波形蛋白与纤维连接蛋白染色为阳性,细胞角蛋白染色为阴性,表明兔胎儿成纤维细胞纯度高,活性好;染色体检测结果显示,在传至第5代时,80％的成纤维细胞核型正常,为2n=44,属正常范畴;PCR法检测的2株细胞系均来源于兔雄性胎儿.综上表明,本研究建立了兔胎儿成纤维细胞系体外培养、传代、鉴定及其性别鉴定方法,可为转基因兔、克隆兔、兔诱导性多能性干细胞等研究提供充足、可靠的成纤维细胞来源.

关键词：兔胎儿成纤维细胞、细胞分离、培养、鉴定

所属期刊栏目：47

分类号：S814.8;S829.1(普通畜牧学)

资助基金：家畜胚胎工程与繁殖创新团队ASTIP-IAS06-2016;国家自然科学基金面上项目31472100

在线出版日期：2016-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1272-1279