牛MYOZ2基因启动子克隆及活性分析

摘要：

旨在克隆测定牛肌原调节蛋白2基因(Myozenin2,MYOZ2)启动子的全长序列,进行活性区域分析,为牛MYOZ2基因功能和表达调控机理研究提供理论依据.通过5 'RACE方法确定牛MYOZ2基因转录起始位点;采用PCR技术,以牛基因组为模板克隆MYOZ2基因启动子序列.利用在线软件分析启动子区域中可能包含的转录因子结合位点.依据分析结果重新设计引物,构建7个包含不同缺失片段的双荧光素酶报告基因载体,转染C2C12细胞系,利用双荧光素酶系统检测不同片段的启动子活性.结果表明,克隆得到牛MYOZ2基因启动子序列2 065 bp,确定MYOZ2基因的转录起始位点;MYOZ2基因片段-84/+125荧光素酶相对活性极显著高于空载体pGL3-Basic(P＜0.01),MYOZ2基因片段-683/+125荧光素酶相对活性极显著高于基因片段-263/+125(P＜0.01).MYOZ2基因启动子核心区域位于-84/+125 bp,而且MEF2,SRF,MyoD,YY1等转录因子可能参与MYOZ2基因的转录调控.

关键词：牛、肌原调节蛋白2基因启动子、基因克隆、活性分析、5’RACE

所属期刊栏目：47

分类号：S823.8;S813.3(家畜)

资助基金：国家“863”计划2013AA102505;国家现代农业产业技术体系建设专项CARS-38;“十二五”国家科技支撑计划2011BAD28B04-03;陕西省科技统筹创新工程计划2014KTZB02-02;新疆建设兵团重大科技计划2014AA001-1

在线出版日期：2016-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：652-660