SG97A平衡致死系统的构建及其初步应用

摘要：

敲除鸡伤寒沙门菌(SG)减毒疫苗株97A asd基因,构建宿主载体平衡致死系统并表达新城疫病毒(NDV)F蛋白,构建二价活菌苗.PCR扩增两段位于asd基因外侧的序列作为等位基因,以氯霉素抗性(CmR)基因替代asd基因,构建自杀质粒pGMB151△asd::CmR,通过E.coli x7213与SG97A固相杂交,将质粒转入SG97A,反向筛选获得SG97A△asd::CmR,利用质粒pCP20去除CmR后,DAP的依赖菌株命名为SG97 A△asd.将含asd基因的质粒pYA3334转入SG97A△asd中构建宿主载体平衡致死系统,并表达NDV-F蛋白.结果表明,通过等位基因重组方法,成功构建SG97A△asd及宿主载体平衡致死系统,重组菌能够表达NDV-F蛋白,并能在鸡体内诱导产生特异性抗体.本研究成功构建SG97A△asd宿主载体平衡致死系统,并表达NDV-F蛋白及其诱导宿主产生抗体,为应用该系统构建二价活菌苗的研究奠定了基础.

关键词：鸡伤寒沙门菌、asd基因、宿主载体平衡致死系统、NDV-F蛋白

所属期刊栏目：46

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：公益性行业农业项目201403054;“863”项目2011AA10A212;中国博士后基金2014M551670;江苏省重点实验室开放课题0273896034819;江苏省博士后基金1302067C;扬州大学创新培育基金2013CXJ070

在线出版日期：2016-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：2243-2250