TALENs编辑绵羊成纤维细胞FGF 5基因

摘要：

类转录激活因子效应物(Transcription activator-like effector,TALE)已经成为基因组编辑和基因转录调控的有效工具,在多个物种的基因组中实现特定位点的删除、插入和突变.针对绵羊成纤维细胞生长因子5 (Fibroblast growth factor 5,FGF 5)基因起始密码子ATG位点,设计构建TALENs(Transcription activator-like effector nucleases,TALENs).通过比较分析正常培养和基因组编辑处理的绵羊成纤维细胞,电转TALENs组合,Surveyor突变检测,筛选获得1对有效的TALENs.有限稀释细胞传代培养,PCR扩增FGF 5基因片段,经PAGE检测筛选发生突变的细胞,测序确认FGF 5基因ATG位点产生缺失突变细胞.获得具有编辑活性的TALENs,为该基因的定点编辑奠定基础.Surveyor检测和测序结果表明,在绵羊FGF 5基因ATG起始密码子上游104碱基位点,存在1个G/C单核苷酸多态.

关键词：类转录激活因子效应物核酸酶、基因组编辑、成纤维细胞生长因子5基因、单核苷酸多态、绵羊

所属期刊栏目：46

分类号：S826.2(家畜)

资助基金：兵团国际合作2013BC004;新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室项目2013KLS01;国家自然科学基金项目31360276;国家重点基础研究发展计划973计划2015CB150300

在线出版日期：2016-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：704-710