10.11843/j.issn.0366-6964.2014.09.004
鸡不同生精细胞中Piwil1基因启动子区DNA甲基化差异研究
旨在通过检测不同类型生精细胞中Piwil1基因的转录水平和启动子区甲基化状态,为深入探讨该基因在鸡精子发生过程中的转录调控机制奠定基础.通过荧光定量PCR技术检测Piwil1基因在不同生精细胞的mRNA表达水平,同时采用Bisulfite sequencing PCR法对启动子区进行甲基化修饰、转化和克隆测序,分析甲基化状态.结果发现,鸡Piwil1基因在精子中几乎不表达,在精原细胞的表达量显著高于PGCs、SSCs和四倍体(P<0.01).鸡Piwil1基因启动子区-233~+298 bp存在1个CpG岛,该岛有56个CpG位点.第1~10个CpG位点(-233~-129 bp区域),精子细胞、四倍体细胞、PGCs、SSCs中处于未甲基化状态,而精原细胞中甲基化比例高达0.600;第39~55个CpG位点(+105~+252 bp区域),不同细胞中的甲基化水平差异显著,精原细胞中仅为0.212. PGCs、SSCs中DNA高甲基化在一定程度上抑制了Piwil1基因的表达.研究表明:在+105~+252 bp非编码区域甲基化可能对Piwil1基因转录调控有一定影响,但还存在其他转录调控机制.
鸡、Piwil1基因、甲基化、精子发生
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S831.2(家禽)
国家自然科学基金31372297,31172199;江苏省农业科技支撑计划BE2013392
2016-09-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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