牛源产Ⅱ型不耐热肠毒素大肠杆菌的分离鉴定及重组毒素制备

摘要：

产Ⅱ型不耐热肠毒素(LT-Ⅱ)大肠杆菌是一类能引起严重腹泻的人畜共患肠道致病菌.为了解LT-Ⅱ在牛源腹泻性大肠杆菌中的流行情况,本研究对2010-2012年间分离的138株大肠杆菌进行了LT-Ⅱ毒素基因的检测,对分离到的10株LT-Ⅱ阳性大肠杆菌进行了测序及分析.进一步将LT-Ⅱc1毒素基因双顺反子的ORF克隆入pET30a表达载体、转化Rossatta感受态并诱导表达重组LT-Ⅱc1毒素,经Y-1小鼠肾上腺皮质细胞对重组毒素进行了初步的毒性验证.结果显示,所分离的10株LT-Ⅱ阳性大肠杆菌中,有8株表达LT-Ⅱc1毒素,1株表达LT-Ⅱc4毒素,1株表达LT-Ⅱc6毒素.SDS-PAGE和Western Blot结果表明成功地制备出LT-Ⅱc1重组毒素,该重组毒素可以使Y-1小鼠肾上腺皮质细胞发生明显的病变,其细胞最小致死量为17.8 pg.本研究为中国国内首次分离到牛源产LT-Ⅱ型不耐热肠毒素大肠杆菌,为深入研究LT-Ⅱ毒素奠定了基础.

关键词：大肠杆菌Ⅱ型不耐热肠毒素、重组毒素、细胞毒性

所属期刊栏目：45

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划项目2012BAD12B03,2012BAD12B05;黑龙江省科技计划项目GC12B303

在线出版日期：2016-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1336-1341