10.11843/j.issn.0366-6964.2014.04.020
PCV2通过激活MyD88调控体外培养PAMs分泌IL-1β、IL-6和IL-10
试验选取6头猪圆环病毒2型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原、抗体均为阴性的30日龄断奶仔猪,无菌分离肺泡巨噬细胞(AMs),分4组进行体外培养:对照组、髓样分化因子88 (MyD88)干扰组(干扰组)、PCV2感染组(PCV2组)、PCV2感染-MyD88干扰组(PCV2-干扰组).采用小干扰RNA (siRNA)方法使MyD88基因沉默,并分别于培养后0、6、12、24和48 h收集细胞及培养上清液.用荧光定量PCR法检测干扰效率,Western Blot方法检测细胞内MyD88蛋白的表达变化,ELISA方法检测培养上清液中IL-1β、IL-6和IL-10的动态变化.结果显示,siRNA能使78%的MyD88基因沉默,并显著影响其蛋白表达;AMs中MyD88表达量,PCV2组从6h开始显著升高(P<0.05),PCV2-干扰组与PCV2组相比在12、24、48 h差异极显著(P<0.01).培养后各时间点,PCV2均能明显促进AMs分泌IL-1β(P<0.01或P<0.05),PCV2-干扰组和PCV2组相比,IL-1β的分泌量均显著降低(P<0.05).PCV2能显著增加感染后6和12 h IL-6的分泌量(P<0.01),PCV2-干扰组和PCV2组相比,IL 6的分泌量在6和12h显著降低(P<0.05).PCV2明显促进感染后12、24和48 h AMs分泌IL-10的能力(P<0.01),PCV2-干扰组和PCV2组相比,IL-10的含量在24和48 h均极显著的降低(P<0.01).结果表明,PCV2可引起体外培养的PAMs分泌IL-1β、IL-6和IL-10发生不同的变化,而MyD88是引起这些变化的重要调节因子.
猪圆环病毒2型、猪肺泡巨噬细胞、髓样分化因子88、细胞因子
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S852.33(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金项目31172292
2016-09-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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