RNAi对小鼠胚胎成纤维细胞中MC1R基因表达的影响

摘要：

旨在研究RNAi对小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)黑素皮质素受体1(Melanocortin-1 receptor,MC1R)基因表达的影响；以MC1R基因作为影响哺乳动物毛色性状的候选基因,通过RNA干扰(RNAi)技术抑制小鼠胚胎成纤维细胞中MC1R基因表达.合成3对针对小鼠MEF中MC1R基因的瞬时干扰siRNA,采用反向转染法将siRNA转染入MEF,取转染siRNA 48 h后的小鼠胚胎成纤维细胞提取总RNA和总蛋白,并通过QRT-PCR技术和Western bolt检测MC1R mRNA和其蛋白的相对表达量；结果显示,siRNA1组和siRNA2组的MC1R mRNA相对表达量和MC1R蛋白表达量显著低于空白对照组(P＜0.05),但siRNA3组表达不显著；本试验利用反向转染方法,成功地对体外培养的小鼠胚胎成纤维细胞进行siRNA转染.MC1R基因与蛋白的抑制情况相一致,说明siRNA1和siRNA2对MC1R的抑制效果确实有效,并筛选出有显著干扰效果的siRNA,为进一步研究MC1R在毛色发育过程中的调控机理提供科学依据.

关键词：小干扰RNA、黑素皮质素受体1基因、小鼠胚胎成纤维细胞、抑制率

所属期刊栏目：45

分类号：S814.8(普通畜牧学)

资助基金：国家自然科学基金项目30972223,31272628

在线出版日期：2016-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：218-224