多重PCR检测奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体

摘要：

为了建立同步检测奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体感染的多重PCR方法,根据GenBank上具有属间特异性的布鲁菌Bp26基因、鹦鹉热衣原体23S rRNA基因和贝纳氏柯克斯氏体IS1111a基因,利用Primer premier 5.0软件各设计1对特异性引物.通过优化PCR反应体系和扩增条件,建立了能够同时检测奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体的多重PCR方法.该方法具有较好的特异性和可重复性,对3种基因单重PCR检测敏感性均达到3.1×102拷贝·反应-1,对3种病原基因同步检测的敏感性能达到3.1×103拷贝,反应一.利用该方法对采自不同流产牛的抗凝全血、血清、流产胎儿及奶液等172份临床样品进行检测,检测到布鲁菌感染阳性样品53份,鹦鹉热衣原体感染阳性样品2份,贝纳氏柯克斯氏体感染阳性样品10份,且检测到布鲁菌和鹦鹉衣原体混合感染阳性样品2份,布鲁菌和贝纳氏柯克斯氏体混合感染阳性样品2份,尚未检测到3种病原混合感染的阳性样品.结果表明,建立的多重PCR方法可以用来对奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体进行同步、快速、灵敏的检测.

关键词：布鲁菌、鹦鹉热衣原体、贝纳氏柯克斯氏体、多重PCR、共扩增

所属期刊栏目：45

分类号：S854.43;S852.614;S852.67;S852.69(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家质量监督检验检疫总局科研项目2011IK017;国家科技支撑计划项目2013BAD12B04

在线出版日期：2016-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：123-128