豆状带绦虫Tp18基因的原核表达及其产物的抗原性分析

摘要：

为评价豆状带绦虫Tp18重组蛋白对兔豆状囊尾蚴病的免疫保护效果和诊断应用价值,从豆状带绦虫成虫转录组数据库中筛选到Tp18基因,并进行克隆和原核表达,以纯化后的重组蛋白作为免疫原和反应原.免疫保护试验设计了重组蛋白组、佐剂组和PBS组,共免疫2次(间隔14 d),二免后的第7天用5 000个豆状带绦虫虫卵攻虫;攻虫后的第49天屠宰实验兔,统计兔体内豆状囊尾蚴的数量.整个试验过程中每周采血,分离血清进行IgG和IgA水平检测.同时,设计了Tp18重组蛋白和PBS重复组,试验程序和检测指标均与第一次试验相同.此外,采用Tp18重组蛋白建立了诊断家兔豆状囊尾蚴病的Dot-ELISA方法,对169份家兔血清进行分析,评估其诊断应用价值.结果表明表达的Tp18基因成熟肽的重组蛋白约为32 ku,Western blotting证明该重组蛋白与豆状带绦虫感染兔阳性血清具有良好的反应原性.Tp18重组蛋白组的减虫率为95.59％(重复组为97.38％),极显著高于佐剂组和PBS组(P＜0.01);诱导产生的特异性抗体为IgG.以病原学检查为金标准,Tp18重组蛋白建立的Dot-ELISA诊断方法具有较高的敏感性(49/54,90.74％)和特异性(111/115,96.52％).研究结果表明,Tp18重组蛋白可作为豆状带绦虫的疫苗抗原和诊断抗原,为兔豆状囊尾蚴病的防控提供了理论基础.

关键词：豆状带绦虫、Tp18基因、原核表达、免疫保护、诊断

所属期刊栏目：44

分类号：S852.734(动物医学（兽医学）)

资助基金：教育部长江学者和创新团队发展计划IRT0848

在线出版日期：2014-03-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1819-1825