10.11843/j.issn.0366-6964.2013.07.009
饲养层密度对兔类ES细胞分离培养的影响
探讨饲养层细胞接种密度对兔类ES细胞分离培养影响,筛选适合兔类ES细胞分离培养最适饲养层密度.将兔囊胚分别接种到密度为10×103、20×103和40×103个·cm-2的小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblast cell,MEF)饲养层上,观察兔类ES细胞贴壁和克隆生长情况,并对所得兔类ES细胞进行碱性磷酸酶和Oct-4检测.结果表明,接种于密度为20×103个·cm-2饲养层上的囊胚贴壁率(82.5%)、内细胞团(Inner cell mass,ICM)形成率(67.5%)高于接种于密度为40×103个·cm-2的饲养层上囊胚贴壁率(80.0%)、内细胞团(Inner cell mass,ICM)形成率(65.7%),差异不显著(P>0.05);显著高于(P<0.05)接种于密度为10×103个·cm-2饲养层上的囊胚贴壁率(55.6%)、ICM形成率(44.4%).密度为20×103个·cm-2饲养层上的兔类ES细胞F1、F2代细胞克隆率均显著高于其他两组(P<0.05),最高已传至20代;获得的兔类ES细胞经碱性磷酸酶染色及表面抗原Oct-4表达检测均呈阳性.密度为20×103个·cm-2的MEF饲养层可更好支持兔类ES细胞体外培养.
成纤维细胞、密度、兔类ES细胞
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S829.1;Q813(家畜)
国家自然科学基金31001096
2013-09-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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