10.11843/j.issn.0366-6964.2013.07.007
褪黑素对小鼠卵母细胞氧化应激及孤雌发育的影响
通过小鼠卵母细胞自发成熟体外培养模型研究了褪黑素(MT)对外源性H2O2刺激的小鼠卵母细胞体外成熟及其孤雌发育的影响.结果表明:(1)随着H2O2剂量依赖性的增加,卵母细胞PB1的排出率下降,当增加H2O2(>250μmol·L-1)时,显著下降(19.4% vs.92.0%,P<0.05);(2)培养液中添加MT(0.1、1.0、10.0 ng·mL-1)后均能阻止H2O2的抑制作用,其中10.0 ng·mL-1的MT作用效果显著(P<0.05);(3)取GV期卵母细胞经H2O2(500 μmol·L-1)和MT(0.000、0.001、0.010、0.100 ng·mL-1)联合培养后孵育在2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCF-DA)中,荧光显色表明,MT清除了由于H2O2引起的细胞内大量的活性氧(Reactive oxygen species,ROS),其中0.100 ng·mL-1的MT效果最显著(P<0.05),极大程度的降低了氧化应激损伤,提高了成熟率;(4)统计卵母细胞孤雌激活后的发育情况,MT浓度为10-9~10-3 mol·L-1组培养的孤雌胚2-细胞发育情况无显著差异(88.2%、91.4%、91.8%、88.8% vs.88.1%,P>0.05),MT浓度为10-7~10-3mol· L-1组的4~8-细胞率差异显著(58.8%、73.8%、43.6% vs.23.4%,P<0.05),MT浓度为10-9~10-5 mol· L-1均明显促进囊胚发育(24.6%、46.6%、49.2%vs.8.0%,P<0.05).氧化应激对卵母细胞的成熟是不利的,MT保护了卵母细胞免受氧化应激的影响,MT浓度为10-5 mol·L-1为卵母细胞孤雌发育能力的最适浓度.由此可推出MT作为细胞内的自由基清除剂,可能是提高卵母细胞和胚胎质量的重要条件之一.
褪黑素、卵母细胞、H2O2、抗氧化剂、孤雌发育
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Q132.4(生物形态学)
吉林省科技厅重点项目"人血清白蛋白转基因延边奶山羊新品系培育"20100228
2013-09-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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