猪圆环病毒2型对体外培养仔猪淋巴细胞NF-κB信号的动态影响

摘要：

检测猪圆环病毒2型(PCV2)对体外培养仔猪淋巴细胞核因子-κB(NF-κB)信号的动态影响,探讨PCV2调控仔猪淋巴细胞炎性细胞因子产生与变化的机制.选取5头PCV2和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)血清抗体和抗原阴性的普通断奶仔猪,无菌采集脾脏,分离脾脏细胞制成单个细胞悬液进行体外培养.分为对照组和试验组,试验组每毫升细胞悬液加PCV2病毒(病毒滴度为5×105 TCID50·mL-1)悬液200 μL;对照组加等量1640细胞培养液,并分别于培养后0、6、12、24 h收取悬浮的淋巴细胞.激光共聚焦显微镜检测NF-κB核易位,WesternBlot检测核蛋白中NF-κB/P65、胞质蛋白中磷酸化抑制性κBα (p-IκBα)含量,电泳迁移率(EMSA)法检测NF-κB与DNA的结合率.结果如下:淋巴细胞中NF-κB/P65蛋白核易位随着PCV2作用时间的延长而增加;淋巴细胞核中NF-κB/P65蛋白随PCV2作用时间增加逐渐升高,6h后均显著高于同时间对照组(P＜0.05);NF-κB与DNA的结合率也随PCV2作用时间增加逐渐升高,PCV2作用6h后均显著高于对照组(P＜0.05);淋巴细胞胞质中的p-IκBα蛋白水平在PCV2作用24 h时达到峰值,并且培养6、12和24 h均极显著高于同时间对照组(P＜0.01).研究表明PCV2可通过IκB的磷酸化降解途径显著激活仔猪淋巴细胞中NF-κB信号,使其发生核易位并与DNA发生结合,从而调控相关炎性细胞因子的表达.

关键词：猪圆环病毒2型、淋巴细胞、核因子κB、磷酸化抑制性κBα

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分类号：S852.33;S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31172292,30871848

在线出版日期：2013-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：760-766