1株髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒感染性克隆的构建与病毒拯救

摘要：

为构建髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV-J) SCGS-1株前病毒cDNA分子标记感染性克隆,根据SCGS-1全基因测序结果,分3段进行全序列PCR扩增,顺次连接至pUC19,构建SCGS-1株前病毒cDNA感染性克隆pUC-SCGS;通过重叠PCR方法对SCGS-1基因组进行沉默突变,在4 684位点引入Sal I位点,构建SCGS-1株分子标记感染性克隆pUC-△SCGS;以pUC-SCGS和pUC-△SCGS重组质粒转染CEF进行病毒拯救,并通过PCR、间接免疫荧光与双抗体夹心ELISA进行拯救病毒检测.结果显示,成功构建pUC-SCGS与pUC-△SCGS重组质粒,转染后盲传第3代、第4代细胞与上清中均检测到拯救病毒;间接免疫荧光与抗原ELISA方法分别在CEF细胞和上清中检测到ALV-J抗原.成功拯救获得分子标记ALV-J.

关键词：髓细胞瘤型、J亚群禽白血病病毒、感染性克隆、分子标记、病毒拯救

所属期刊栏目：44

分类号：S852.659.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：教育部《长江学者和创新团队发展计划》创新团队项目IRTO848

在线出版日期：2013-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：754-759