禽波纳病毒分离鉴定及其恒温扩增检测分析

摘要：

利用腺胃扩张症(PDD)患病鹦鹉腺胃RT-PCR阳性病料,接种猪睾丸(ST)传代细胞,分离禽波纳病毒(ABV),建立实时RT-LAMP检测方法.将阳性病料接种ST细胞单层传代,出现细胞圆缩、脱落,ABV基质蛋白(M)基因扩增产物出现预计大小351 bp条带,测序后进化树分析显示为ABV5基因型.针对M基因设计ID37、ID30、ID19、ID6和ID1共5组引物,后3组引物RT-LAMP呈阳性反应.利用钙黄绿素建立实时RT-LAMP,分别在36(ID30)、38(ID37)和49(ID19)min出现扩增反应曲线,60 min内扩增达到峰值.对各种临床样品检测与RT-PCR结果一致,新城疫等类症病毒未见阳性反应,显示较高的特异性 ;对细胞培养物检测10-1～10-5为阳性,比较RT-PCR敏感性提高约100倍.RT-LAMP检测方法的建立为PDD防制提供新的检测方法,也是波纳病公共卫生研究有益的参考.

关键词：禽波纳病毒、腺胃扩张症、环介导逆转录恒温扩增、快速检测、进化树分析

所属期刊栏目：43

分类号：S852.659.3;S858.315.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：出入境检验检疫科研项目2009-GDK16;质检公益性行业科研专项10-65

在线出版日期：2013-01-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1847-1854