乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达及其免疫原性的研究
收集某猪场1例发病种公猪的睾丸病料,处理后采用细胞培养与乳鼠脑内接毒相结合的方法盲传并结合RT-PCR方法分离鉴定,命名为乙型脑炎病毒(JEV)贵州分离株(GZ株),然后根据GenBank登录的日本乙型脑炎病毒SA14和SA14- 14-2株全基因序列设计并合成1对扩增E基因的特异性引物,用RT-PCR方法扩增出JEV贵州分离株E基因,并将E基因克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19- T -E,经双酶切鉴定、测序及序列分析鉴定后,再将E基因亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建乙脑病毒E基因原核表达质粒pET-32a-E,将构建好的原核表达质粒pET- 32a-E转化至宿主菌BL21 (DH3)中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDSPAGE电泳和Western blot分析,得到了约59 ku条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化和浓缩目的蛋白,并将其加入弗氏佐剂后免疫小鼠,免疫后采血检测抗体.结果显示:乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达目的蛋白能诱导小鼠产生一定抗体水平,该研究为乙型脑炎亚单位疫苗的研究奠定了基础.
乙型脑炎病毒、贵州分离株、E基因、原核表达、免疫原性
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S852.659.6(动物医学（兽医学）)
2006年贵州省高层次人才科研条件特助经费项目TZJF-2006年01号;贵州省2011年农业攻关项目黔科合NY字20113103号;贵州省2010年农业科技攻关项目黔科合NY字20103042号
2012-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
1330-1336
