重组牦牛肌肉生长抑制素成熟肽的纯化及其免疫原性研究

摘要：

为了探索牦牛MSTN的作用机制,寻找合适的阻断MSTN活性的方法,最终实现牦牛的高效率育肥,本研究采用RT-PCR方法克隆牦牛MSTN成熟肽基因,构建MSTN-pET28a(+)重组表达载体,进而在E.coliBI21(DE3)宿主菌中进行表达,将表达产物用亲和层析纯化,最后用ELISA方法检测牦牛MSTN重组成熟肽的免疫原性.重组载体中连接的牦牛MS TN成熟肽基因包含330 bp,编码109个氨基酸.含MSTN-pET28a(+)重组载体的工程菌经0.1 mmol·L-1 IPTG诱导表达6h后,MSTN成熟肽的表达量约占蛋白总量的21％,总蛋白经亲和层析纯化后得到了高纯度的牦牛MSTN重组成熟肽,分子量约16.5 ku；ELISA结果显示,兔抗牦牛MSTN重组成熟肽的血清效价为32 000个抗体单位,表明牦牛MSTN重组成熟肽具有较好的免疫原性.本研究建立了牦牛MSTN重组成熟肽高效表达系统并纯化获得具有免疫原性的牦牛重组MSTN成熟肽,这为通过调控MSTN功能来改良牦牛产肉性能的研究储备了技术条件.

关键词：肌肉生长抑制素、牦牛、重组表达、亲和层析、免疫原性

所属期刊栏目：43

分类号：S823.85;S813.3(家畜)

资助基金：“973”计划前期研究专项基金2007CB116204;西南民族大学动物科学学科建设项目2011XWD-S0905

在线出版日期：2012-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1210-1214