猪戊型肝炎病毒Ⅳ型衣壳蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

为获得猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)Ⅳ型衣壳蛋白单克隆抗体,将猪HEV衣壳蛋白的C端267(408-675)个氨基酸基因序列克隆人原核表达载体pET-28a(+),构建重组质粒pET-28a-ORF2-C,转化E.coli Rosetta (BL21)感受态细胞进行诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定,纯化后免疫小鼠.取免疫小鼠的脾脏与鼠骨髓瘤细胞SP2/O融合制备单克隆抗体.通过间接ELISA和竞争ELISA方法筛选并鉴定单抗.结果表明蛋白得到正确、高效表达,获得3株识别不同的抗原表位区的单克隆抗体,分别命名为Mab-1E4 (IgG1)、Mab-2C7 (IgG1)和Mab-2G9 (IgG2b),其中1E4和2G9能阻断临床阳性猪血清,提示该2株单克隆抗体识别的抗原表位是猪HEV Ⅳ型衣壳蛋白上重要的抗原表位区,而单抗Mab-2C7不能阻断.本研究为猪HEV Ⅳ型的诊断及研究提供重要工具.

关键词：猪戊型肝炎病毒、衣壳蛋白、单克隆抗体、鉴定

所属期刊栏目：43

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：山东省“泰山学者”建设工程项目040-72010

在线出版日期：2012-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：950-955