猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法的建立

摘要：

本研究旨在建立猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法.根据Shimen株设计1对特异性引物,建立猪瘟病毒RT-PCR-RFLP检测方法；对20份疑似猪瘟临床样品进行检测,并对检出的山东8株流行野毒株和2株疫苗株PCR产物进行克隆与序列分析,验证上述方法.结果RT-PCR扩增片段为825 bp,产物经RFLP分析,野毒株的PCR产物能被ApaⅠ酶切为322 bp和503 bp 2个片段,兔化弱毒疫苗株则不能被酶切,检测出RNA的最低浓度为0.028 6 μg,mL-1;8株流行野毒株都含GGGCCC序列(ApaⅠ酶切位点),2株疫苗株相应序列为GAGCCC,不能被Apa Ⅰ酶切；8株流行野毒株属于基因2群,2株疫苗株与HCLV遗传关系近,为基因1群.建立了可鉴别猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP检测方法,为猪瘟的防控提供有效手段.

关键词：猪瘟病毒、野毒株、兔化弱毒疫苗株、RT-PCR-RFLP

所属期刊栏目：43

分类号：S852.651(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划2011BAD34B00;科技基础性工作专项SQ2012FY3260033;山东省生猪产业创新团队建设;青岛市公共领域科技支撑计划11-2-3-24-nsh

在线出版日期：2012-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：943-949