副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素的细胞毒性研究

摘要：

本研究旨在原核表达副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素(Cytolethal distending toxin,CDT),并作用于猪髋动脉内皮细胞(Pig iliac endothelial cells,PIEC),以研究其细胞毒性.根据本实验室完成的副猪嗜血杆菌SH 0165株(血清5型)全基因组序列,针对cdtA、cdtB和cdtC基因序列设计引物,扩增的基因片段大小分别约为681、834和531 bp.将靶基因克隆到原核表达载体pET28a中,再转化到E.coliBL21( DE3),IPTG诱导表达3h,SDSPAGE和Western blot检测证实表达产物以包涵体形式存在,大小分别约36、34和28 ku.通过体外重构毒素与PIEC细胞作用3h,继续培养72 h观察细胞形态学变化.结果表明,CdtABC全毒素致PIEC细胞膨胀、空泡形成、细胞凋亡等,而其他试验组变化不显著.结果提示,CDT毒素可能在细菌感染与致病中发挥着重要作用.

关键词：副猪嗜血杆菌、细胞致死膨胀毒素、毒素、细胞毒性

所属期刊栏目：42

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31072153;公益性行业农业科研专项201003060

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1750-1755