鹅β-防御素基因克隆与生物学特性的初步分析

摘要：

本试验采用RT-PCR方法,从鹅的骨髓细胞中扩增到禽p-防御素(AvBD)基因.测序结果表明,该基因的cDNA大小为201 bp,编码66个氨基酸.经遗传进化分析发现,该基因推导的氨基酸序列与鸡AvBD5的同源性最高,达84.8％.因此,将其命名为鹅AvBD5.进一步将该基因定向插入到pGEX-6p-1的EcoR Ⅰ和SalⅠ双酶切位点上,构建pGEX-AvBD 5重组表达质粒.将重组质粒转化大肠杆菌BL 21,于37℃不同时间进行诱导表达,SDSPAGE检测外源基因的表达情况.结果表明,重组鹅AvBD 5融合蛋白的分子量约为32 ku,重组蛋白以包涵体形式存在.采用菌落计数法进行抗菌活性测定,结果表明,重组鹅AvBD 5有广谱的抗菌活性,对11种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有较强抗菌作用.此外,该蛋白对温度和pH有较高的稳定性.

关键词：鹅β-防御素5、重组蛋白、抗菌活性

所属期刊栏目：42

分类号：S835;Q527(家禽)

资助基金：国家自然科学基金30972110;黑龙江省教育厅科研重点项目11531z05

在线出版日期：2012-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1193-1200