猪源牛病毒性腹泻病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

本研究旨在建立一种荧光定量PCR检测方法,用于猪源牛病毒性腹泻病毒(BVDVs)检测,同时能鉴别诊断猪瘟病毒(CSFV).根据BVDVs与CSFV 5 '-UTR保守序列,设计一套引物和特异TaqMan探针,以本实验室构建的猪源BVDVs 5′-UTR阳性重组质粒为标准品,通过优化反应条件,建立了标准曲线.以构建的标准品为模板进行了特异性、敏感性、重复性试验、并应用于临床检测.结果显示,该方法检测CSFV、猪繁殖与呼吸综合征病毒均为阴性；最低可检测到每个反应相当于10拷贝的标准品DNA；重复性试验的批内变异系数为0.20％～0.95％；应用所建立方法对临床样品进行检测,其结果与普通RT-PCR结果的符合率为86.7％.本研究建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于猪感染BVDVs、猪瘟疫苗污染BVDVs的监测.

关键词：猪源牛病毒性腹泻病毒、实时荧光定量RT-PCR、TaqMan探针

所属期刊栏目：42

分类号：S854.43;S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目2010JB15

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1046-1050