鹅垂体特异性转录因子荧光素酶报告基因重组体的构建和鉴定
为研究垂体特异性转录因子(Pituitary transcription factor 1,Pit1)启动子转录调控机制,将获得的Pit1基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,构建Pit1基因启动子调控的报告基因重组表达质粒.本研究利用染色体步移技术扩增鹅Pit1基因的启动子,定向亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic中,构建含有正确目的基因的报告基因重组体pGL3-Pit1,并通过限性内切酶酶切、PCR及测序进行鉴定.通过酶切鉴定及基因测序证明,所克隆的基因产物与预期结果一致,序列无碱基突变.结果,成功构建了含有Pit1启动子基因序列的荧光素酶报告基因真核表达载体,为下一步分析该启动子活性及转录调控机理奠定基础.
鹅、Pit1基因、启动子、荧光素酶基因表达载体
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S835;S831.2(家禽)
现代农业产业技术体系建设专项资金nycytx-45 04;优质高产水禽新品种选育国家科技部支撑计划重大专项资金2006BDA01A09;国家科技支撑计划重点项目2006BDA14B06;江苏省属高校自然科学基础研究面上项目07KJB230138
2012-04-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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