鸡Perilipin1抗血清制备及组织表达特性分析
通过制备鸡脂滴包被蛋白(Perilipin1)的抗血清,分析鸡Perilipin1的组织表达特性并推测其在脂肪组织脂类代谢过程中发挥的功能.利用RT-PCR的方法扩增鸡Perilipin1基因,并将其构建到含有His标签的表达载体pET-28a上.将阳性重组表达质粒pET-28a/Perilipin1导入大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下产生His/Perilipin1融合蛋白,对产生的His/Perilipin1蛋白包涵体进行复性处理,复性后以其为免疫原制备鸡Perilipin1多克隆抗血清.通过ELISA和Western blot的方法检测抗血清的效价及特异性,并利用此抗血清分析鸡Perilipin1在各种组织中的表达特性以及比较其在高、低脂系公鸡间的表达差异.ELISA和Western blot结果表明,本试验获得了效价高、特异性强的鸡Perilipin1抗血清,同时Western blot检测Perilipin1的组织表达特性结果表明,Perilipin1仅在鸡脂肪组织中表达,而在肝脏、十二指肠、胸肌、腿肌、肌胃、心脏、脾脏、肾脏等组织中未检测到表达信号;Perilipin1在肉鸡高脂系脂肪组织中的表达量显著高于低脂系中的表达量(P<0.05).结果表明,Perilipin1的表达与肉鸡腹部脂肪的沉积具有密切的关系.
鸡、脂滴包被蛋白、抗血清、表达特性
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S831.2(家禽)
国家重点基础研究发展计划973计划项目2006CB102105;国家高技术研究发展计划863项目2006AA10A120;国家重点基础研究发展计划973计划项目2009CB941604
2011-07-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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349-355