猪链球菌2型分泌核酸酶(SsnA)的表达、ELISA方法建立及其在鉴别诊断中的应用
猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)是一种广泛分布的人畜共患病原菌,严重危害着人类健康和养猪业的发展.本试验旨在研究分泌核酸酶基因(SsnA)作为分子诊断标识在对SS2感染的鉴别诊断中所起的作用.作者以SS2-LT菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增SsnA基因片段,将该片段克隆到表达载体pET-28a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,获得大小为46 ku的融合蛋白,经SDS-PAGE和Western blot分析表明,重组蛋白质具有抗原反应活性.以纯化的融合蛋白作为包被抗原,建立了SsnA-ELISA鉴别诊断方法.对已知背景的人工感染及疫苗免疫血清和临床血清进行检测,比较感染血清和免疫血清的检测结果,结果发现两者差异显著(P＜0.05),表明建立的SsnA-ELISA方法具有良好的检测效果.利用该方法对采集自8个省份的1 446份血清进行检测,显示SS2的阳性率为0%～14.77%,平均阳性率为5.39%.本研究结果表明:猪链球菌2型SsnA可以作为一个良好的鉴别感染的分子诊断标识;对临床血清的检测结果表明感染及流行与气候环境存在明显的关系.
猪链球菌2型、分泌核酸酶(SsnA)、鉴别诊断、ELISA
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S852.611(动物医学（兽医学）)
国家973计划2010CB534000;国家科技重大专项课题2008ZX10004-013,2009ZX10602-14;转基因生物新品种培育重大专项2009ZX08009-141B;国家公益性行业农业专业专项资助200803018;湖北省自然科学基金2009CDB171
2011-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
228-235
