应用表达微小隐孢子虫P23的重组干酪乳杆菌建立微小隐孢子虫IFAT诊断方法
本试验旨在建立IFAT和间接ELISA方法作为微小隐孢子虫病诊断方法.应用DNA重组技术,构建原核表达载体pGEX-P23,经IPTG诱导表达出GST-P23融合蛋白,并进行纯化,将该重组融合蛋白作为包被抗原,建立ELISA诊断方法;同样构建重组载体pMG-P23,用电转化方法将其转入干酪乳杆菌中,称为重组活干酪乳杆菌(含pMG-P23),以此为已知抗原,建立IFAT诊断方法.应用ELISA和IFAT方法检测来自内蒙古地区的508份牛血清、187份绵羊血清和197份山羊血清:其中ELISA方法在各种动物血清中阳性率依次分别为0.59%、5.88%和4.57%,而IFAT方法则为0.19%、5.88%和4.57%.2种检测方法阳性符合率在牛血清样品中为33.33%,在绵羊和山羊中则均为100%.试验结果表明,重组抗原P23具有良好的反应原性,2种诊断方法的结果基本吻合,显示出良好的一致性和敏感性,可在微小隐孢子虫病的诊断实践中推广应用.
微小隐孢子虫、重组干酪乳杆菌、P23重组抗原、ELISA、IFAT
41
S852.723(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金项目30960279;中国博士后项目57545;内蒙古农业大学"博士启动基金"项目k11629
2011-01-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
1296-1300