猪FcγRⅠ真核表达载体的构建及稳定表达细胞系的建立

摘要：

本研究旨在建立稳定表达猪 FcγR Ⅰ的Mare-145 细胞系.从猪肺泡巨噬细胞中提取总 RNA,应用 RT-PCR 技术获得猪 FcγR Ⅰ和γ链 cDNA,并分别构建 PIREShyg3-γ和 pcDNA3.1-FcγR Ⅰ真核表达质粒;用脂质体共转染 Marc-145 细胞,经潮霉素B(300 μg·mL-1)和G418(400 μg·mL-1)共筛选获得稳定表达猪 FcγR Ⅰ的细胞系;运用 RT-PCR、玫瑰花环和流式细胞术对细胞系进行鉴定.结果表明成功构建了猪 FcγR Ⅰ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪 FcγR Ⅰ的细胞系,且表达于转染细胞表面的 poFcγR Ⅰ受体分子能与猪 IgG 特异结合.本研究为进一步研究奠定了基础.

关键词：猪FcγRⅠ受体、共转染、Marc-145细胞

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分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金重点项目30730068;国家973计划2005CB522800

在线出版日期：2010-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：909-914