TNF-α在IFN-γ诱导的感染牛分枝杆菌的THP-1细胞凋亡过程中的作用及相关信号通路分析

摘要：

为研究IFN-γ对感染牛分枝杆菌的THP-1细胞的促凋亡作用,及TNF-α在此细胞凋亡过程中的作用和相关信号分子的变化,使用浓度为15 ng·mL-1的IFN-γ作用于不同剂量牛分枝杆菌北京株(MO110:1,20:1)感染的THP-1细胞,在感染后12、24、36、48和72 h,使用流式细胞仪测定细胞凋亡百分比.结果显示,IFN-γ诱导了M.bovis北京株感染的细胞凋亡,并且凋亡呈时间相关性.随着细胞凋亡百分比的增加,牛分枝杆菌的CFU降低.在IFN-γ和M.bovis北京株(MO110 : 1)处理的巨噬细胞内加入抗TNF-α单克隆抗体,感染后36 h,细胞凋亡百分比测定结果显示,加入抗TNF-α单抗抑制了IFN-γ诱导的M bovis感染的THP-1细胞的凋亡,与对照组相比,差异显著(P<0.05);用分光光度计检测表明Caspase-3和Caspase-8的激活是TNF-α依赖性的.在IFN-γ和M bovis北京株(MO110:1)作用的THP-1细胞内分别加入JNK inhibitor I或NEMO-Binding Domain Binding Peptide,或同时加入2种抑制剂,36 h后测定细胞凋亡情况,与对照组相比,加入抑制剂后,细胞凋亡无显著差异(P>0.05),说明在本试验中,JNK通路和NF-κB凋亡通路未被激活.本研究初步阐明了TNF-α在IFN-γ诱导的感染牛分枝杆菌的细胞凋亡过程中的作用及相关信号通路.

关键词：牛分枝杆菌、IFN-γ、THP-1细胞、细胞凋亡、TNF-α、信号通路

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分类号：S852.618(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划2006BAD06A13,2008BAK42B08-5

在线出版日期：2010-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：581-586