TSA对滩羊成纤维细胞作为供体细胞的作用
为探索成纤维细胞作为供体细胞的潜能和Trichostatin A(TSA)处理供体细胞的适合浓度,提高克隆胚胎的发育水平.本研究分别利用100、50、25、10 ng·mL~(-1)TSA处理滩羊成纤维细胞,观察细胞形态,统计细胞活率,利用流式分选技术分析处理前后细胞的周期时相,同时通过间接免疫荧光法检测细胞乙酰化水平,并以经过10~50 ng·mL~(-1)TSA处理的成纤维细胞作为供体细胞,检测其重构胚发育水平.结果发现,当TSA的浓度达100ng·mL~(-1)时,细胞大量死亡,不同浓度TSA处理细胞24 h后,细胞周期被明显抑制在G_0/G_1期,乙酰化水平明显高于对照组,其中供体细胞经10 ng·mL~(-1) TSA处理的克隆胚胎卵裂率和囊胚率明显升高(P<0.05,(85.2±3.4)%vs(68.6±6.7)%,(35.6±5.7)%vs(10.4±8.3)%).结果表明,经10 ng·mL~(-1)TSA处理的滩羊成纤维细胞周期同步化明显,乙酰化维持较高水平,重构胚胎发育水平明显提高,适合作为成纤维细胞的处理方法和浓度.
滩羊、TSA、成纤维细胞、乙酰化
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S827;S814.8(家畜)
"863"高新技术发展计划2006AA10Z198;国家自然科技平台建设项目2005DKA21101
2010-06-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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