西农萨能奶山羊泌乳中期和后期乳腺组织差异基因的筛选

摘要：

旨在利用抑制性削减杂交(SSH)技术筛选西农萨能奶山羊泌乳中期和后期的差异表达基因,并用实时定量PCR(Q-PCR)分析差异基因的表达丰度,探讨奶山羊不同泌乳阶段乳腺组织的基因表达规律.本研究以西农萨能奶山羊泌乳中期和后期乳腺组织的mRNA瓦为检测子(Tester)和驱动子(Driver)构建cDNA消减文库(M-L和L-M),随机挑选克隆测序,进行序列比对分析,并检测部分差异基因在乳腺组织中的表达丰度.结果,成功构建了泌乳中期和后期的cDNA文库,随机挑选30个克隆测序,得到M-L和L-M文库中与细胞凋亡、抗氧化、脂类代谢、能量代谢等生理过程相关的差异基因,对其中的6个基因进行实时定量分析,发现5个均为阳性克隆,表达水平增加了1.3～5.5倍不等.结果表明,利用SSH技术成功构建了泌乳中期和后期乳腺组织正反向消减cDNA文库,筛选出24个差异基因,为进一步研究奶山羊乳腺组织基因调控机理奠定了基础.

关键词：西农萨能羊、乳腺组织、抑制性削减杂交、差异表达基因、实时定量PCR

所属期刊栏目：41

分类号：S827;S814.8(家畜)

资助基金：国家863项目"奶山羊乳腺脂肪酸代谢基因网络分析"2008AA10Z135;国家科技支撑计划项目2006BAD04A11;北京市科学技术研究院创新团队计划

在线出版日期：2010-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：16-21