10.3321/j.issn:0366-6964.2009.05.019
鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的原核表达及生物学活性分析
通过PCR方法扩增不含信号肽的鸡GM-CSF成熟蛋白基因,克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建原核表达质粒p32GM-CSF,通过IPTG诱导重组鸡GM-CSF蛋白表达,经镍离子亲和层析纯化后,用MTT法检测表达重组蛋白的生物学活性,并制备免抗鸡GM-CSF多克隆抗体.结果表明成功地构建了 p32GM-CSF原核表达质粒,SDS-PAGE结果显示表达的重组蛋白约34 ku,主要以包涵体形式表达,纯化后得到高纯度日的蛋白.Western Blot结果表明,该重组蛋白能与制备的抗鸡GM-CSF抗体特异性结合.MTT试验证实,该重组蛋白具有明显增强鸡骨髓细胞增殖的生物学活性;这些研究结果表明.表达的重组ehGM-CSF蛋白及其多克隆抗体拥有相应的生物学功能,这将为进一步研究鸡GM-CSF蛋白的生物学功能及其应用奠定基础.
鸡、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、原核表达、生物学活性
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S852.4;Q78(动物医学(兽医学))
国家"十一五"863计划资助2006AA10A205
2009-06-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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