Tsol18基因密码子优化对其表达及重组蛋白免疫效果的影响

摘要：

定点突变猪带绦虫六钩蚴(oncosphere)Tsol18基因的4个碱基,并截去其N端16氨基酸信号肽的编码序列,构建pGEX-Tsol18-sp表达载体,IPTG诱导表达后进行产物的SDS-PAGE、Western blot及稳定性分析;取该基因修饰前、后所表达的重组蛋白免疫猪,以ELISA检测抗体水平,并通过屠宰检虫评价、比较免疫效果.结果显示:修饰后的Tsol18-sp基因共有7个碱基发生同义突变,表达产物主要是约38.7 ku的可溶性融合蛋白,在4℃保存2个月后约降解20.1%,能与猪带绦虫六钩蚴阳性血清反应;TSOL18和TSOL18-sp抗原免疫试验猪后均能诱导高水平抗体的产生,但TSOL18-sp抗原的保护率较TSOL18抗原有明显的提高(100%vs 20%).表明Tsol18经修饰后,其重组表达产物的生物学活性和稳定性都有很大改善,可作为囊虫病免疫预防的候选抗原.

关键词：猪带绦虫六钩蚴、Tsol18-sp、基因修饰、抗原性

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分类号：S852.734;R383(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家高科技研究发展计划"863"项目2006AA10A207;甘肃省重大科技专项2GS063-A43-013

在线出版日期：2009-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：409-415