猪支气管败血波氏杆菌菌毛fimD基因的克隆表达及间接ELISA检测方法的建立

摘要：

参照GenBank上支气管败血波氏杆菌的菌毛fimD基因序列(X75811),设计1对引物,从本实验室分离鉴定的猪源支气管败血波氏杆菌中扩增出fimD编码区1 098 bp的片段,将其克隆至原核表达载体pET-28a,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行融合表达.SDS-PAGE和Western blot检测让实该表达产物以包涵体形式存在,大小约42 ku,与用支气管败血波氏杆菌体制备的阳性血清能发生特异性反应.将包涵体变性和复性后包被酶标板建立间接ELISA(fimD-ELISA),特异性良好.用fimD-ELISA检测临床送检的668份血清,阳性率为30.7%.用该法与微量凝集试验平行检测102份血清,fimD-ELISA的敏感性高于微量凝集试验.

关键词：支气管败血波氏杆菌、fimD、克隆、表达、ELISA

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分类号：S852.614(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目30471292;国家"863计划"2006AA10A206

在线出版日期：2009-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：98-102