快速鉴别奶牛乳腺炎细菌或真菌的双重PCR方法

摘要：

综合多种细菌、真菌DNA模板的提取方法,采用β-巯基乙醇裂解细胞壁,利用蜗牛酶和溶菌酶消化细胞壁,再利用石英砂机械破壁,能彻底破坏细菌、真菌细胞壁,提取高质量的DNA,摸索出一套从奶样中同时提取细菌、真菌核酸的新方法.建立双重PCR方法,同时完成对细菌16S rRNA保守区特异性基因片段和真菌18S rRNA保守区特异性基因片段的扩增,快速诊断奶牛乳房炎是细菌感染还是真菌感染或是混合感染.对采自临床型乳腺炎和隐性乳腺炎病例的共计84个乳样分别用传统细菌学培养法和双重PCR方法对比鉴定.结果表明,双重PCR检测乳样细菌的最小浓度为102 CFU/mL,检测乳样真菌的最小浓度为103 CFU/mL.双重PCR方法对细菌的检测与平板培养检测方法比较差异不显著(P>0.05),对真菌的检测与平板培养检测方法比较具有更高的检出率(P<0.01).

关键词：奶牛乳腺炎、细菌、真菌、双重PCR

所属期刊栏目：39

分类号：S858.23;S857.26(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2009-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1554-1561