AIV NP基因在噬菌体表面的展示及间接ELISA方法的建立

摘要：

利用DNA重组技术,将禽流感病毒(AIV)核蛋白基因片段克隆重组于溶菌酶缺陷噬菌体T4-z1,获得重组噬菌体T4-z1-NP.经SDS-PAGE和Western blot检测证实,AIV核蛋白成功地在T4噬菌体表面展示.以T4-z1-NP为抗原建立了检测禽流感抗体的酶联免疫吸附试验 (T4-NP-ELISA)方法.其与琼脂免疫扩散试验(AGP)的相对灵敏度为100%,特异性为87.62%,T4-NP-ELISA的检测准确率为91.43%.T4-NP-ELISA 可检测H5、H7和H9亚型AIV特异性抗体,而IBD、IB、MD、ND、EDS的阳性血清检测结果则为阴性.敏感性试验证实,当阳性血清以1∶640倍稀释时仍能检测到流感病毒抗体,说明该方法比较敏感.对192份血样的检测显示, T4-NP-ELISA与IDDEXX ELISA符合率为96.8%.这表明T4-NP-ELISA可检测AIV抗体,也为检测与诊断AI提供了一种技术选择.

关键词：禽流感病毒、核蛋白、T4噬菌体、展示、T4-NP-ELISA

所属期刊栏目：39

分类号：S852.659.5;Q78(动物医学（兽医学）)

资助基金：广东省科技攻关计划资助项目A20403

在线出版日期：2009-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1537-1543