氟苯尼考耐药菌的构建及大肠杆菌中FloR蛋白定位

摘要：

通过对floR基因序列的分析,将扩增的包含floR基因上游调控序列及下游终止序列的约1550 bp DNA片段克隆到pGEM-T easy载体上,成功构建了pGEM-floR质粒,将质粒转入JM109中,药物敏感性试验显示构建的pGEM-floR/JM109基因工程菌对氯霉素和氟苯尼考高度耐药,对四环素和庆大霉素敏感.本试验成功构建了一个基因背景清楚且对氟苯尼考耐药的细菌模型,排除了细菌中其他氟苯尼考耐药基因或泵出蛋白对floR基因贡献细菌耐药表型及进一步试验的影响.分别提取CVM1841、pGEM-floR/JM109、pGEM/JM109和JM109膜蛋白,运用实验审制备的鼠抗GsT-FloR1抗体进行免疫印迹反应,蛋白定位显示FloR蛋白位于细菌的细胞膜上.本试验结果证实floR基因编码的蛋白位于细胞膜,并贡献细菌对氯霉素和氟苯尼考的交叉耐药性.

关键词：氟苯尼考、基因克隆、蛋白定位

所属期刊栏目：39

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金30170715;国家"十一五"科技支撵计划项目2006BAK02A03

在线出版日期：2008-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1438-1441