重组鸡抗菌肽Gallinacin-9的原核表达及其抗菌活性的鉴定

摘要：

采用RT-PCR方法,从鸡舌组织中扩增到Gallinacin-9(Gal-9)基因,测序表明Gal-9为201 bp,其成熟肽由67个氨基酸残基组成.进一步将克隆的Gal-9基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1的EcDR I和SalI双酶切位点上,构建重组表达质粒pGEX-Gal-9,经序列分析鉴定确证目的基因克隆入载体的预期位点.将重组质粒转化大肠杆菌BL21,于37℃诱导培养不同时间,SDS-PAGE电泳表明该基因在大肠杆菌中高水平表达,表达的重组鸡Gal-9融合蛋白相对分子质量约为32 ku.重组蛋白占菌体总蛋白的40%.表达的重组鸡Gal-9融合蛋白以包涵体的形式存在.重组蛋白经纯化后,分别以对数生长中期的大肠杆菌BL21(DE3-)株与致病性链球菌CAB株为榆测菌,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定了重组Gal-9蛋白的抗菌活性,结果表明,重组Gal-9对这2种细菌都具有抗菌活性.

关键词：Gallinacins-9、鸡、融合蛋白、抗菌活性

所属期刊栏目：39

分类号：S852.42;Q78(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金30600435;NOVUS国际科研基金;黑龙江省教育厅重点项目1153LZ05

在线出版日期：2008-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1426-1431