10.3321/j.issn:0366-6964.2008.06.017
荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平
白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用.本试验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,并采用该方法对26~50日龄商品鸡外周血淋巴细胞(PBL)中CD4和CD8 mRNA表达水平进行了检测.结果显示:所建立的RRT-PCR对CD4和CD8 mRNA的扩增效率分别为93%和91%;线性范围分别在10-4~10-9和10-3~10-9;相关系数分别为0.998 0和0.999 9;最低分别能检测105和120拷贝;熔解曲线分别在78.2和86.7℃附近出现1个单特异峰;组内变异系数分别在1.13%~2.15%和1.17%~3.68%,组间变异系数分别在1.16%~3.25%和1.66%~2.86%.26~50日龄鸡PBL CD4和CD8的mRNA表达水平有小幅波动,与采用流式细胞术检测结果的报道一致.本试验建立的RRT-PCR方法敏感性高、稳定性和再现性好,为检测鸡CD4、CD8基因表达水平提供了精确定量的新方法.
荧光定量RT-PCR、鸡、CD4、CD8、mRNA
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S852.4(动物医学(兽医学))
"十一五"国家科技支撑计划重大项目资助2006BAD06A11;四川省应用基础项目05JY029-007-5
2008-11-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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