荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平

摘要：

白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用.本试验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,并采用该方法对26～50日龄商品鸡外周血淋巴细胞(PBL)中CD4和CD8 mRNA表达水平进行了检测.结果显示:所建立的RRT-PCR对CD4和CD8 mRNA的扩增效率分别为93%和91%;线性范围分别在10-4～10-9和10-3～10-9;相关系数分别为0.998 0和0.999 9;最低分别能检测105和120拷贝;熔解曲线分别在78.2和86.7℃附近出现1个单特异峰;组内变异系数分别在1.13%～2.15%和1.17%～3.68%,组间变异系数分别在1.16%～3.25%和1.66%～2.86%.26～50日龄鸡PBL CD4和CD8的mRNA表达水平有小幅波动,与采用流式细胞术检测结果的报道一致.本试验建立的RRT-PCR方法敏感性高、稳定性和再现性好,为检测鸡CD4、CD8基因表达水平提供了精确定量的新方法.

关键词：荧光定量RT-PCR、鸡、CD4、CD8、mRNA

所属期刊栏目：39

分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金："十一五"国家科技支撑计划重大项目资助2006BAD06A11;四川省应用基础项目05JY029-007-5

在线出版日期：2008-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：784-790