实时荧光定量PCR检测H1N1亚型猪流感病毒

摘要：

根据GenBank中H1N1亚型猪流感病毒NP基因的序列(DQ889686),利用Premier express设计并合成1对引物和相应的TaqMan探针,从猪流感病毒HN407株接种的鸡胚尿囊液中提取总RNA,经RT-PCR扩增NP基因.将鉴定正确的NP基因片段克隆入pGEM-T Easy载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒.以该阳性重组质粒为荧光定量PCR标准品模板建立标准曲线.对探针浓度、引物浓度、镁离子浓度和退火温度进行优化,建立了最佳的荧光定量PCR反应体系和扩增程序.经临床应用表明荧光定量PCR的建立为早期诊断猪流感病毒、定量分析猪流感病毒感染程度奠定了基础.

关键词：猪流感病毒、H1N1亚型、荧光定量PCR

所属期刊栏目：39

分类号：S858.285.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：河南省杰出人才创新基金项目0621002100

在线出版日期：2008-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：752-756