转录靶向猪瘟病毒3′-UTR shRNA细胞株干扰猪瘟病毒增殖的检测

摘要：

对筛选的转录猪瘟病毒石门株3′-UTR shRNA的PK-15细胞株P-1(114～132位)、P-2(136～154位)和P-3(209～227位)分别接种猪瘟病毒(CSFV),在接毒后第72和96小时用半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测CSFV NS3基因及β-actin基因,以研究构建细胞株在转录水平上对CSFV增殖干扰的效果;接毒后第72、96和148小时以酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测细胞NS3蛋白表达量,通过OD490值分析构建细胞株在病毒蛋白表达水平上对CSFV增殖的影响.检测结果表明:(1)接毒后第72和96小时P-1、P-2和P-3细胞株中NS3基因的量明显减少,与接毒的空白PK-15细胞比较差异显著(P<0.05),说明P-1、P-2和P-3细胞株转录的shRNA能干扰CSFV RNA的转录;(2)接毒后第72和96小时P-1、P-2、P-3细胞株中NS3蛋白的表达量明显少于接毒的PK-15细胞(P<0.05),说明转录的shRNA在病毒蛋白水平上能干扰CSFV NS3基因的表达,但接毒后第148小时干扰效果有所降低.

关键词：半定量RT-PCR、ELISA、猪瘟病毒、3′-UTR

所属期刊栏目：39

分类号：S852.65+1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目30270988

在线出版日期：2008-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：746-751