10.3321/j.issn:0366-6964.2008.03.023
猪带绦虫未知基因SLC10在毕赤酵母中的表达
SLC10 是以反式剪切引导序列为基础,通过 RT-PCR 从猪囊尾蚴中克隆到的一个未知基因.将猪囊尾蚴SLC10 基因从重组克隆载体 pGEM-SLC10 扩增并酶切后,与相应酶切处理的毕赤酵母分泌性表达载体 pPICgK 相连接,构建重组表达载体 pPIC9K-SLC10,转化大肠杆菌 JM109,经PCR、酶切和测序鉴定,基因序列完全正确.纯化的重组质粒 pPIC9K-SLC10 用内切酶 Sac Ⅰ线性化,电转化毕赤酵母,使重组表达载体与酵母染色体发生同源整合;采用G418抗性梯度法筛选多拷贝重组菌株,用甲醇进行诱导表达;通过SDS-PAGE和 Western-blot 分析表达产物,结果表明目的蛋白得到了表达,但不具有免疫反应性.
SLC10 基因、毕赤酵母、表达
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S852.73+4;Q78(动物医学(兽医学))
国家高技术研究发展计划863计划2006AA10A207;甘肃省重大科技专项2GS063-A43-013
2008-05-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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