重组绵羊pEGFP-PRNP质粒构建及真核细胞转染

摘要：

构建了携带绵羊朊蛋白基因(PRNP)的重组真核转染质粒,通过脂质体转染试剂将其转染至神经胶质瘤细胞(C6),以期为进一步研究绵羊朊蛋白的生理功能和从细胞水平研究朊蛋白疾病的发病机制奠定基础.采用PCR扩增目的基因序列,纯化后将其克隆到带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-N1中,对重组质粒pEGFP-PRNP做酶切鉴定.而后采用阳离子脂质体转染法将重组质粒转染到C6细胞,荧光显微镜观察.经鉴定,绵羊PRNP基因已克隆到真核表达载体pEGFP-N1中,成功地构建了重组pEGFP-PRNP质粒,并可稳定地在C6细胞中表达.本研究为外源朊蛋白在细胞中表达提供了平台,为进一步在细胞水平研究朊病毒疾病奠定了基础.

关键词：绵羊、转染、朊蛋白、绿色荧光蛋白

所属期刊栏目：39

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：高等学校博士学科点专项科研项目20050019031;国家自然科学基金30500371;30571399

在线出版日期：2008-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：113-116