猪蛔虫感染期幼虫抑制消减cDNA文库的构建

摘要：

为筛选与线虫感染性相关的基因,本研究以猪蛔虫为对象,构建猪蛔虫感染期幼虫差异表达消减cDNA文库,为研究线虫期特异性发育的分子机制奠定基础.分别提取感染期幼虫和其它各期幼虫及成虫的总RNA,纯化mRNA后,采用Clontech公司PCR-selectTM试剂盒进行反转录合成cDNA并进行抑制消减杂交(SSH),构建猪蛔虫感染期幼虫差异表达的消减cDNA文库,并采用Southern斑点杂交进行消减效率的检测.随机从文库中抽取45个克隆进行测序及在线BLAST分析.试验结果表明,感染期幼虫差异表达的消减cDNA文库具有较强的特异性;在得到的41个表达序列标签(ESTs)中,有40个ESTs与已报道的基因有较高的相似性,主要代表猪蛔虫第三期幼虫基因和成虫头部基因,有1个cDNA片段可能代表新基因.猪蛔虫感染期幼虫差异表达消减cDNA文库的成功构建,为进一步研究幼虫发育差异表达基因的功能奠定了基础.

关键词：猪蛔虫、感染期幼虫、抑制消减杂交、差异表达基因、消减cDNA文库、斑点杂交

所属期刊栏目：38

分类号：S852.73+1;Q785(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金30671578;国际科学基金IFSIFS;B/4018-1;广东省科技厅科技计划2004B50201020

在线出版日期：2007-09-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：832-836