猪瘟病毒实时荧光定量RT-PCR的建立及其对人工感染猪体内猪瘟病毒的检测

摘要：

本研究应用猪瘟病毒通用引物和野毒特异性TaqMan探针,并以质粒作为阳性标准品,结合Corbett公司的RotorGene3000荧光定量PCR仪,建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测猪瘟病毒核酸载量的TaqMan荧光定量RT-PCR方法.该方法在108～101范围内具有良好的线性关系,可检测到初始模板中10拷贝/μL的病毒核酸,与本实验室建立的RT-套式PCR(RT-nPCR)具有相近的敏感性,二者对152份不同样品检测符合率达94.7%.应用本方法对人工感染106TCID50猪瘟石门强毒的猪只感染后0～14 d全血中猪瘟病毒RNA进行了定量检测,揭示了猪瘟病毒在猪体内复制的动态变化,证实了感染猪临床表现与病毒滴度存在明显的时间相关性.此外发现,在同居感染猪出现猪瘟临床症状前3～4 d可从其全血中检出病毒RNA.

关键词：猪瘟病毒、荧光定量RT-PCR、TaqMan荧光探针、RT-nPCR

所属期刊栏目：38

分类号：S852.65+1;S858.284.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2005CB523202;国家科技支撑计划2006BAD06A03

在线出版日期：2007-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：685-693