鸡PPAR-γ基因表达载体构建及抗血清制备

摘要：

为构建鸡PPAR-γ,基因的原核和真核表达载体并制备鸡PPAR-γ的抗血清,根据鸡PPAR-γ基因cDNA序列设计一对引物,采用RT-PCR的方法扩增鸡PPAR-γ基因的cDNA片段并将其分别插入到原核表达载体pGEX-4T-1和真核表达载体pcDNA3中;进而诱导重组原核表达载体pGEX-4T-1/PPAR-γ在大肠杆菌BL21中表达;同时利用重组真核表达载体pcDNA3/PPAR-γ免疫注射小鼠使其产生免疫应答.SDS-PAGE结果显示pGEX-4T-1/PPAR-γ在大肠杆菌BL21中得到了高效的表达.ELISA和Western blot结果表明,pcDNA3/PPAR-γ免疫小鼠产生了效价较高和特异性较强的抗体.本研究所构建的真核表达载体pcDNA3/PPAR-γ为在细胞水平上研究鸡PPAR-γ,基因超表达提供了有力的工具;所获得的重组蛋白和抗血清为在蛋白水平上研究鸡PPAR-γ基因的功能奠定了基础.

关键词：鸡、PPAR-γ基因、载体构建、抗血清

所属期刊栏目：38

分类号：S831.2(家禽)

资助基金：中国博士后科学基金2005037018;新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金2005XJDX004

在线出版日期：2007-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：651-656