猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法的研究

摘要：

以猪附红细胞体和多种血营养菌16S rRNA基因的保守区设计合成引物HM-f/HM-r,在反向引物的5′端用生物素标记,以猪附红细胞体广东株16S rRNA基因的可变区序列设计种特异性寡核苷酸探针,探针的5′端用地高辛标记,成功地建立了猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法.通过测定不同浓度PCR产物对应的微孔板杂交-酶反应显色OD值,用SPSS统计软件进行回归分析,得到回归方程为y=2.101 2-0.449 2×logx,其相关系数R为0.977,显示对未知样品可进行定量检测.该方法与猪的多种细菌性病原、猫血巴尔通氏体CA株和E. wenyonii无交叉反应,其敏感性比常规PCR琼脂糖电泳检测提高了近100倍.用建立的方法对38份临床样品进行检测,结果有12份检测结果为阳性.

关键词：猪附红细胞体、PCR、微孔板杂交、检测

所属期刊栏目：38

分类号：S854.4;S858.285(动物医学（兽医学）)

资助基金：广东省农业科技攻关项目2005B20201008;广东省自然科学基金020388

在线出版日期：2007-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：184-189