囊胚注射转基因ES细胞制作嵌合体的研究

摘要：

在小鼠胚胎成纤维细胞制作的饲养层上培养并成功的维持了携带LacZ基因的胚胎干细胞系(S8),在此基础上,以S8为供体细胞,以远交系昆明白小鼠3.5 d胚胎为受体,通过显微注射法将供体细胞转移到受体的囊胚腔内,经过恢复培养,移植到代孕鼠昆明白雌鼠的子宫中;后代在嵌合体出生一周后进行判定.本试验用8～13代的S8细胞共注射胚胎597枚,经1～3 h恢复培养,有585枚胚胎重新具有膨大的囊胚腔,细胞轮廓分明,滋养层细胞间连接也清晰可见,胚胎成活率为97%;胚胎移植后,代孕母鼠共移植胚胎228枚,经17～19 d的妊娠期后,产仔37只(2只死胎),产仔率为16%;有35只仔鼠(雄鼠18只,雌鼠17只)存活到可以判断毛色,共获得8只S8细胞毛色嵌合体小鼠,嵌合体的产生率为21.6%.结果表明用S8细胞经囊胚注射后能够获得嵌合体,并且嵌合体明显发生了性偏离现象.本试验为国内利用囊胚注射携带LacZ基因的胚胎干细胞获得嵌合体小鼠的首例报道.

关键词：胚胎干细胞、囊胚注射、LacZ基因、胚胎移植、嵌合体小鼠

所属期刊栏目：38

分类号：Q813.7(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划001CB509903;001CB509904

在线出版日期：2007-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：149-154